甲壳素降解酶产生菌的产酶条件优化

论文编号:SW240  论文字数:12568,页数:30  附任务书，开题报告，文献综述，答辩PPT，外文翻译

甲壳素降解酶产生菌的条件优化
摘要：甲壳素是一种极其有前途和极其重要的天然高分子可再生的物质，是不造成环境污染的新型高分子材料。本实验通过对甲壳素降解酶产生菌发酵条件的优化，并设计了Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验、响应曲面设计和验证实验，最终确定最优条件为KH2PO4  0.5g/L，MgSO4·7H2O 0.4g/L，NaCl 0.4g/L，CaCl2·2H2O 0.05g/L，NH4Cl 0.5g/L，SL-7溶液  1ml/L，FeCl2-EDTA   1ml/L，酵母粉 15g/L，接种量 6%，PH=6。优化结果可以使甲壳素降解酶产生菌的酶活性大大提高。

关键词：甲壳素；降解酶；优化

Chitin-degrading enzyme-producing strain of the condition optimization

Abstract: Chitin is a very promising and very important renewable natural polymer material, is not to cause environmental pollution, new polymer materials. In this study, chitin-degrading enzyme produced by fermentation of the optimization and design of the Plackett-Burman experiment steepest ascent experiment, response surface design and verification experiments, ultimately determine the optimal conditions for KH2PO4 0.5g / L, MgSO4 • 7H2O 0.4g / L, NaCl 0.4g / L, CaCl2 • 2H2O 0.05g / L, NH4Cl 0.5g / L, SL-7 solution 1ml / L, FeCl2-EDTA 1ml / L, yeast extract 15g / L, inoculum size 6 %, PH = 6. Optimization results can produce chitin-degrading enzyme activity of bacteria is greatly increased.
关键词 ： 甲壳素；降解酶；优化Key words: chitin; degrading enzyme; Optimization

目录
中文摘要………………………………………………………………………………I
英文摘要……………………………………………………….………………….....II
目录……………………………………………………………………………….III
1    绪论…………………………………………………….…………………...…..1
 1.1  内容概述………………………………………………………….……....1
 1.1.1  甲壳素和壳聚糖的性质………………………………………….....2
 1.1.2  壳寡糖的应用.........................................3
 1.1.3 甲壳素降解酶产生菌的研究历史与产生现状……………............8
2    实验部分……………………................................10
 2.1  实验材料………………………………...………………………….. .10
 2.1.1 菌种………………………………  ………………………….…....10
 2.1.2 主要原料和试剂…………………………………………………....10
 2.1.3 主要仪器……………………………………………………………10
 2.1.4 培养基………………………………………………………………10
2.2 实验方法………………………………………....……………………..11
 2.2.1 胶质甲壳素的配制…………………………………………………11
 2.2.2 标准曲线的绘制……………………………………………………11
 2.2.3 不同碳源对发酵的影响…………..…………..……………………12
 2.2.4 不同氮源对发酵的影响………..……..……………………………12
 2.2.5 不同碳源浓度对发酵的影响………………………………………12
 2.2.6 不同氮源浓度对发酵的影响……………………………. . . ……...12
 2.2.7 不同的菌种接种量对发酵的影响…………………………………12
 2.2.8 培养基初始pH对发酵的影响……………………………………….12
 2.2.9 Zn2+对发酵的影响……………………………………………………12
 2.2.10 Cu2+对发酵的影响………………………………………. . ………..13
 2.2.11 Mg2+对发酵的响…………………………………………………….13
 2.2.12 Ca2+对发酵的影响………………………………………………….13
 2.2.13 PLACKETT-BURMAN设计实验……………………………………….14
 2.2.14 最陡爬坡实验……………………………………………………..14
 2.2.15 响应曲面设计……………………………………………………..14
 2.2.16 酶活测定方法……………………………………………………..15                                              
3.  结果与讨论…………………………………………………………………......16
   3.1.1 标准曲线的制作…………………………………………………….16
  3.1.2 不同碳源对发酵产酶的影响……………………………. . ……….16
   3.1.3 不同氮源对发酵产酶的影响……………………………………….17
   3.1.4 不同甲壳素浓度对发酵产酶的影响…………………. . . .………...18
   3.1.5 不同酵母粉浓度对发酵产酶的影响………………. . . .…………...18
   3.1.6 不同接种量对发酵产酶的影响…………………………….………19
   3.1.7 不同pH对发酵产酶的影响………………………………………….19
 3.1.8 不同Zn2++浓度对发酵产酶的影响………………. . . .…………………20
 3.1.9 不同Cu2+浓度对发酵产酶的影响…………………………………..20
 3.1.10 不同Mg2+浓度对发酵产酶的影响………………. . . .…………...…21
 3.1.11 不同Ca2+浓度对发酵产酶的影响………………. . . .…………...…22
 3.1.12 PLACKETT-BURMAN设计实验................................22
 3.1.13 最陡爬坡实验…………………………………………………...…23
 3.1.14 响应曲面设计... ... ... ... ... ... ... ... .24
4    总结与展望…………………………………………………………. .28
致    谢………………………………………………………………. . .. . 30
参考文献………………………………………………. .………………………31
附录