粗毛栓菌漆酶的初步分离与纯化

论文编号:SP055  论文字数:4107,页数:07,附任务书,开题报告,中期检查,答辩记录

粗毛栓菌漆酶的初步分离与纯化
摘要 将粗毛栓菌接种在含有麦草粉的培养基中培养25d，浸提得粗酶液，尔后经超滤浓缩、盐析和透析，将透析液上样于Q-Sepharose F. F.层析柱，获得具有漆酶活性的组分。
关键词 粗毛栓菌，漆酶，离子交换层析

 Seperation and Purification of Laccases in Trametes gallica Fr.
Abstract  Trametes gallica Fr. was cultivated in wheat straw powder for 25 days. The crude enzyme was ultrafiltrated, salted out, dialyzed and applied to Q-Sepharose FF ion exchage column. The effluent with laccase acticity was obtained.
Key words  Trametes gallica,  laccase,  ion exchage chromatography

 目  录

摘要……………………………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………………………1
Abstract………………………………………………………………………………………1
Key words……………………………………………………………………………………1
引言………………………………………………………………………………1
1材料与方法………………………………………………………………………………2
1.1材料 ……………………………………………………………………………………2
1.1.1菌种……………………………………………………………………………………2       
1.1.2主要仪器………………………………………………………………………………2
1.1.3主要试剂………………………………………………………………………………2
1.1.4 PDA培养基……………………………………………………………………………2
1.1.5高产漆酶液体培养基 ………………………………………………………………2
1.2方法 …………………………………………………………………………………2
1.2.1粗酶的制作…………………………………………………………………2
1.2.2 粗酶的超虑浓缩…………………………………………………………………3
1.2.3 硫酸铵盐析…………………………………………………………………………3
 1.2.4透析……………………………………………………………………………………3
1.2.5 离子交换柱层析………………………………………………………………………3
1.2.6 酶活力的测定…………………………………………………………………………3
1.2.7蛋白含量的测定………………………………………………………………………3
2 分析和讨论…………………………………………………………………………………3
2.1漆酶的诱导………………………………………………………………………3
2.2 离子交换层析对漆酶的分离与纯化……………………………………………………3
2.2.1表1.洗脱组分漆酶活力测定结果…………………………………………………4
2.2.2 图1.粗毛栓菌漆酶的Q-Sepharose柱层析洗脱曲线……………………………4
2.3 蛋白质含量标准曲线…………………………………………………………………………4
2.3.1 表2.牛血清蛋白浓度与光密度值的关系…………………………………………4
2.3.2 图2.蛋白质含量标准曲线…………………………………………………………4
2.4 表3.粗毛栓菌漆酶的柱层析纯化结果 ………………………………………………5
参考文献………………………………………………………………………………………5
致谢……………………………………………………………………………………………6