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黄芪热性中药的抗肿瘤进展(三)
黄芪热性中药的抗肿瘤进展
1.柴胡桂枝汤辨证要点:柴胡桂枝汤是小柴胡汤与桂枝汤的合方。因此,本方以小柴胡汤证和桂枝汤证作为辨证要点,即以小柴胡汤证为基础,加上残余的表证。此外,柴胡桂枝汤用于内科杂病中,常以心下痞满、时腹痛、腹肌紧张、胸胁苦满作为辨证要点。由七情所致的诸症也属于柴胡桂枝汤证。
2.柴胡桂枝汤适应病 :肠伤寒、疟疾、猩红热、流行性腮腺炎的并发症、小儿呼吸道反复感染、感冒、支气管哮喘、干性胸膜炎、心绞痛、高血压病、心律失常、慢性胃炎、胃痉挛、胃及十二指肠溃疡、胃酸过多症、慢性胰腺炎、慢性胆囊炎、胆囊息肉、胆石症、胆道功能紊乱、溃疡性结肠炎、克隆病、十二指肠壅积症、结肠左曲症、肾盂肾炎、肾病综合征、血小板减少性紫癜、神经性斜颈、神经官能症、癫痫(包括腹型癫痫)、三叉神经痛、顽固性头痛、肋间神经痛、癔症性瘫痪、植物神经功能紊乱性疾病、骨外科腹部术后并发症、移动性盲肠、肩周炎、继发性闭经、更年期综合征、痛经、产后发热。其他如流行性出血热、腹膜炎、过敏性鼻炎、鼾声、单纯疱疹病毒性角膜炎等。
四、药典中的含量测定方法
(1)北柴胡照高效液相色谱法(通则0512,P59)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为210nm。理论板数按柴胡皂苷a峰计算应不低于10000。
时间(分钟) 流动相A (乙腈% ) 流动相B (水% )
0〜50 25→90 75→10
50〜55 90 10
对照品溶液的制备 取柴胡皂苷al对照品、柴胡皂苷d 对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lm l含柴胡皂苷a 0.4mg、柴胡皂苷d 0.5mg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约0. 5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加入含5% 浓氨试液的甲醇溶液25ml,密塞,30℃水温超声处理(功率200W,频率40kHz)30分钟,滤过,用甲醇20ml分2 次洗涤容器及药渣,洗液与滤液合并,回收溶剂至干。残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液20μl与供试品溶液10〜20μl,注人液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含柴胡皂苷a (C42H68013 )和柴胡皂苷d (C42H68013)的总量不得少于0.30% 。
(2)小柴胡制剂含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相;检测波长为315nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含60μg溶液,即得。
供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品,混匀,取适量,研细,取约3g〔规格(1)〕、1.3g〔规格(2)〕或约0.8g〔规格(3)〕,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率50kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
五、含量测定实例
(1)小柴胡颗粒含量测定方法
小柴胡颗粒处方为:柴胡240g,黄芩90g,半夏(姜制)90g,党参90g,生姜90g,甘草90g,大枣90g.2005《中国药典》新增hplc含量测定方法,现将有关其含量测定方法作一总结。
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相;检测波长为315nm.理论板数按黄芩苷峰计应不低于3000.医学|教育|网搜集整理
供试品溶液的制备:取装量差异项下的本品,研细,取约3g或约1.5g(无蔗糖),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加70%乙醇50ml,密塞,称定重 量,超声处理(功率250w,频率50khz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量测定方法,并对样品进行含量测定。方法采用紫外分光光度法,以柴胡皂苷a为对照品,在波长545nm处对样品中的总皂苷进行含量测定;采用高效液相色谱法,以C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)、甲醇-水为流动相,流速为1mL.min-1,检测波长为210nm,测定样品中柴胡皂苷a的含量。结果柴胡总皂苷在30~70μg/mL、柴胡皂苷a在50.4~252μg/mL范围内呈良好的线性关系r,分别为09956、0.9991;平均回收率:柴胡总皂苷为99.31%、柴胡皂苷a为99.22%;RSD:柴胡总皂苷为1.25%,柴胡皂苷a为1.07%。结论本研究所建立的紫外分光光度法测定柴胡总皂苷及高效液相法测定皂苷a含量的方法,简便、易行、快速,结果准确可靠,适用于柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量测定,并为在安全剂量范围内正确使用柴胡提供依据。
考察不同产地柴胡有效成分的含量,为柴胡的质量标准提供一定的依据.方法 采用HPLC测定不同产地北柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量,以kromasil C18 (200 mm×4.6 mm 5 μm)为色谱柱;流动相:乙腈-水,采用梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;柱温:30 ℃;检验波长:204 nm.结果 柴胡皂苷a在0.704~14.08 μg,柴胡皂苷d在0.732~14.64 μg的线性关系良好;平均回收率分别为99.3%,102.2%;KSD分别为1.44%,2.15%.结论 不同产地的北柴胡中柴胡皂苷a、d含量差异较大。
以上实例参考于中国药典—作者:国家药典委员会。
参考文献
[1]《伤寒论》为东汉张仲景所著汉医经典著作,是一部阐述外感病治疗规律的专著,全书10卷。
张仲景[1]原著《伤寒杂病论》在流传的过程中,经后人整理编纂将其中外感热病内容结集为《伤寒论》,另一部分主要论述内科杂病,名为《金匮要略方论》。
[2] 王子融,毛凤仙,刘承梅.柴胡桂枝汤加减治疗心律失常24例[J].河南中医,1991,21(4):11.
[3] 王明如,竹青.小柴胡汤治疗各种发热举隅[J].中成药,1994,16(6):29.
[4] 关修一郎,杜顺福.柴胡桂枝汤浸膏治疗运动损伤症[J].日本医学介绍,1995,16(9):430.
[5] 成都中医学院,中药学[M],上海科技出版社,1978:51,
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