人工牛黄及其制剂中胆酸含量测定的研究进展(二)

CA在临床上的应用形式主要是牛黄制剂，目前市场上含人工牛黄的中、西药品种繁多，鉴于这些品种均为国家基本用药，同一品种的市药安全，控制药品质量，故应采用恰当的方法测定人工牛黄场价格参差不齐，为了保证人民的用中主成分CA的含量[7]。

4．1紫外一可见分光光度法(UV—V IS)

4．1．1糠醛比色法

CA属甾体类化合物，没有共轭结构，无紫外吸收。因此部颁标准利用糠醛比色法测定人工牛黄及其制剂中CA的含量。由于糠醛比色测定时工牛黄及其制剂中CA的含量。由于糠醛比色测定时空白吸收光谱亦有差别，因此刘珊珊等旧1对人工牛黄中CA测定方法进行改进，利用在比色过程中增设一个糠醛空白，消除了糠醛和硫酸反应产生的颜色干扰，回收率为99．47％，RSD为0．62％(n=5)[8]。

石海琳[9]等将样品和对照品同时采用相应的试剂或水做空白对照，消除了部颁标准因空白不一致造成的测定结果的正误差。运委等人提出以糠醛醋酸溶液代替糠醛水溶液，根据吸收度加和原理，合理扣除各因素的影响，并据此方法测定了感冒通片中CA的含量，获得较为理想的结果。王维礼用活性炭将糠醛溶液脱色，代替新蒸糠醛测定样品CA含量，消除了由于糠醛颜色带来的误差，并与新蒸糠醛比较，结果基本一致。

郁子萱等通过对人工牛黄成品中胆酸含蛙的测定研究发现：硫酸及糠醛浓度、糠醛纯度以及反应温度、时间对结果影响很大，并且要注意标准曲线制作与样品测定条件的一致性。以上所述是在可见光605am处测定得出的结论，现行版药典(2005年版《中国药典》)即利用此方法测定人工牛黄药材中CA的含量[10]。

4．1．2紫外分光光度法

辛勋等人采用紫外分光光度法测定速效伤风胶囊中胆酸的含量，不需色谱分离，只用冰醋提取、加硫酸70℃加热10min反应后便可以测定，胆酸对照品和样晶均在(387±1)tim波长处有最大吸收，且其他成分无干扰，平均回收率为99．4％，RSD为0．33％。方法简便灵敏度高，稳定性好，可作为该制剂质量控制的参考方法。

李素霞[11]等根据不同地方标准对感冒通片中人工牛黄的含量进行测定，经实验证明。测定波长适宜在605nm处，空白试液直接用硫酸溶液即町；样品溶液在加溶剂定容摇匀后，要静置一定时间，取t：清液过滤后测定；使用的硫酸试剂应为分析纯，不合格的硫酸试剂影响测定结果。

4．2薄层扫描法(TLCS) 

分光光度法多用于人工牛黄药材和小复方药物的检测[12]，具有干扰小，灵敏度高，操作简便等特点。但对于多组分复杂的中成药的测定，处理样品繁琐，干扰性大，给测定带来一定影响。薄层扫描法分离度高则适宜多组分中成药中CA检测。主要包括单波长扫描法和双波长扫描法。

4．2．1单波长扫描法

郝美玲等[13]对2种蒙成药中CA的含晕进行了定量研究。以单波长380为扫描波长，乙酸一硫酸一醋酐(10：1：1)为显色剂，得出给旺一13中CA的回收率为99．3％，RSD为1．29％；CA的回收率为98．5％，D为2．27％。

巴俊杰等用薄层扫描法测定蒙成药三臣丸中胆酸的含量，加入氯仿，索氏同流提取，乙醇定容，异辛烷．乙酸乙酯-乙酸(15：7：5)为展开剂，10％硫酸乙醇溶液加热显色，入=385nm，平均同收率为98．53％，RSD为2．26％；而孙田喜等选用甲醇超声处理，残渣加20％氢氧化钠溶液加热回流，最后用甲醇定容。以正己烷一乙酸乙酯一醋酸-甲酸(6：32：l：1)为展开剂，10％磷钼酸乙醇溶液显色，入=620nm测定该药中胆酸的含量，平均回收率为98．27％，RSD为2．1％，方法简便、准确、重现性好[14]。刘长河等采用反射法单波长锯齿扫描法测定柴胡退热口服液中胆酸的含量。展开剂为环己烷一乙酸乙酯一冰醋酸-甲醇(6：32：1：1)，10％硫酸．乙醇为显色剂，入=365nm，平均回收率为98．96％，RSD为2．03％。刘军等¨叫用该法测定新雪颗粒中胆酸的含量，异辛烷一乙酸乙酯，冰醋酸(5：5：1)为展开剂，入=385nm，平均回收率为97．30％，RSD为2．36％。

沈木兰[15]对菊蓝抗流感胶囊人工牛黄胆酸的含量进行测定，乙酸乙酯-正已烷．冰醋酸．甲醇(16：3：0．5：0．3)为展开剂，15％磷钼酸乙醇液加热显色，于685nm波长处测定，平均回收率为99．3％，RSD为2．05％(n=6)。稳定性、重现性均符合要求。顾艳丽等采用单波长薄层扫描法测定图喜木勒-3中人工牛黄胆酸及猪去氧胆酸的含量，胆酸b=375nm，猪去氧胆酸b=385nm。展开剂：正己烷-乙酸乙酯一乙酸-甲醇(20：25：2：3)t-_层，lO％硫酸乙醇液显色。该方法快捷、快速、灵敏度高、重现性好，符合分析要求。

4．2．2双波长扫描法